正向移液与反向移液：两种手法怎么用

同样的移液器、同样的量程，两个人操作出来的结果可能差出几个百分点。除了手法稳定度，主要差别在于是用正向移液还是反向移液，以及有没有按液体性质选对方式。

一、两种手法差在哪

• 1、正向移液：按下按钮到第一档吸液，打液时继续按到第二档吹出残余液体，操作快、废液少，是常规水溶液的标准做法。
• 2、反向移液：先按到第二档再吸液，打液时只按到第一档，让管内留有一部分液体不再吹出，适合黏度大、易起泡或易挥发的液体，可减少挂壁带来的损失。
• 3、两者的差别在于留液量的处理：正向是全量转移，反向是超吸少放。黏性液体挂壁多，反向更容易把设定体积完整转移出去。

二、什么液体用哪种

• 1、水、缓冲液、稀溶液：用正向移液，重复性好，速度也快。
• 2、甘油、血清、蛋白溶液等黏度较高的液体：用反向移液，并适当延长吸液后的停留时间。
• 3、易起泡的表面活性剂类液体：反向移液配合缓慢吸放，减少泡沫进入管腔。
• 4、易挥发溶剂：建议先预湿吸头，即反复吸放几次让管腔内形成饱和蒸汽，再正式移取，可减少挥发造成的体积偏差。

三、准确度还受这几项影响

• 1、量程匹配：尽量让设定体积落在移液器量程的中上部，接近量程下限时误差会放大；小体积优先用小量程移液器，不要用大量程移液器勉强凑合。
• 2、吸头密封：吸头装不到位或与管嘴不匹配会导致漏气，吸液量随之偏小。
• 3、吸液角度与深度：保持垂直，吸头尖端浸入液面下约两到三毫米即可，浸得太深会让外壁挂液被带入。
• 4、温度差：新配溶液与室温不一致时，液体与管腔间的温差会引起体积变化，建议静置到室温再移取。

四、操作习惯上的几个提醒

• 1、按钮释放要平稳，不要弹回，弹回会把液滴或气溶胶带进管腔，污染内部并影响精度。
• 2、移液器保持垂直，倾斜角度过大时管内液柱受力不均，误差随之增加。
• 3、不要用大量程移液器移取微量液体，也不要把液体吸到管腔深处；一旦有液体进入管腔，应停机拆洗。
• 4、定期做称重法核查，按称重结果判断是否需要校准，具体合格判据可参照 ISO 8655 的允差要求。

把手法的适用条件记住，再配合量程匹配与定期核查，日常移液的重复性会稳定很多。