电泳缓冲液TAE和TBE怎么选

电泳缓冲液的作用是让电流通过，同时把 pH 稳定住。核酸电泳常用 TAE 和 TBE 两种，成分不同，适用的片段大小和后续步骤也不同。

一、成分与特性

• 1、TAE 为 Tris-乙酸-EDTA，常用工作浓度约 1×（40 mM Tris-乙酸、1 mM EDTA）。缓冲能力偏弱，长时间或高电压运行易发热、pH 易漂移，DNA 迁移相对快，适合大于 1 kb 的片段。
• 2、TBE 为 Tris-硼酸-EDTA，常用 0.5×（约 89 mM Tris-硼酸、2 mM EDTA）。离子强度高、缓冲能力强，适合小于 1 kb 的片段和长时间运行。
• 3、分辨力取向上，大片段分离和后续胶回收更常选 TAE，小片段高分辨更常选 TBE。

二、怎么选、怎么用

• 1、看下游步骤。若电泳后要从胶里回收 DNA 再做酶切或克隆，选 TAE——TBE 中的硼酸可能抑制后续酶反应。
• 2、看运行时长。短时间（1 小时上下）跑胶 TAE 足够；需要长时间或较高电压，用 TBE 更稳。
• 3、配胶和跑胶尽量用同一批缓冲液，离子强度不一致会让条带变形。
• 4、缓冲液不宜反复使用，出现浑浊或颜色改变时应更换，否则导电性下降会拖慢电泳。